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      elisa試劑盒和生化試劑盒該如何選擇和評判【人elisa試劑盒】

      發(fā)布時(shí)間:2021/6/15 8:33:36      閱讀次數:1863

       隨著(zhù)電子檢驗儀器的研制和普遍使用,推動(dòng)了科研診斷試劑研究和使用廣泛化的進(jìn)程,商品試劑與標準液按檢測項目組合成一套放在一個(gè)包裝盒內叫試劑盒(reagent kit),或叫試劑組合(reagent set).

      與自動(dòng)化分析儀或者酶標儀匹配的試劑盒的研制和供應走向產(chǎn)業(yè)化的道路,它無(wú)疑是科研檢驗發(fā)展史上一個(gè)巨大的技術(shù)進(jìn)步.但是,試劑盒的質(zhì)量,將嚴重影響測定結果的正確性.為了增強識別試劑質(zhì)量的能力,提高拒用劣質(zhì)試劑的自覺(jué)性,掌握有關(guān)試劑盒的質(zhì)量標準和質(zhì)量評價(jià)是有益的.

      我們先來(lái)說(shuō)說(shuō)和自動(dòng)生化分析儀想匹配的生化分析試劑盒的相關(guān)情況.此類(lèi)試劑種類(lèi)繁多,有液體型 粉劑型 片劑型,有單一試劑 雙試劑 干試劑 多試劑等.

      一 液體型試劑和粉(片)劑型試劑

      (一)液體型試劑

      無(wú)論是單試劑還是雙試劑型試劑,目前乃至今后仍以液體型為主要劑型.其優(yōu)點(diǎn)是液體型試劑的試劑組分高度均一,瓶間差異小,測定重復性好和使用方便;它也無(wú)需加入任何輔助試劑及蒸餾水,避免了外源性水質(zhì)對試劑的影響,性能較穩定,測定結果較為準確.缺點(diǎn)是液體型試劑(尤其是酶試劑)保存時(shí)間較短,不便于運輸.

      1.液體單試劑

      所謂液體單試劑就是將某種生化檢驗項目所用到的試劑科學(xué)地混合在一起,組成為一種試劑.應用時(shí),只須將標本和試劑按一定比例混合,即可進(jìn)行相應的生化反應,然后用適當的方法檢測結果.應用十分方便.為了簡(jiǎn)化測定操作程序,提高工作效率,一度大多數試劑廠(chǎng)家都有單試劑,以滿(mǎn)足用戶(hù)的需要.如測定葡萄糖和膽固醇的酶法試劑等.這些試劑的廣泛使用,充分顯示出酶法試劑無(wú)毒性 操作簡(jiǎn)便快速 測定結果可靠等優(yōu)點(diǎn).但對有些生化檢驗項目來(lái)說(shuō),單試劑存在抗干擾能力差的缺點(diǎn),給測定結果帶來(lái)相當大的分析誤差.例如,甘油三酯測定的一步法試劑,由于未消除樣品中的游離甘油,使測定結果中包括了內源性甘油(平均約為 0.11mmol/L),會(huì )給甘油三酯的測定值帶來(lái)較大的誤差.類(lèi)似的情況還見(jiàn)于維生素C和尿酸及膽紅素對Trinder+選用時(shí)值得注意.

      2.液體雙試劑

      所謂液體雙試劑就是將某些生化檢測項目所用到的試劑,按用途科學(xué)地分成兩類(lèi),分別配成兩種試劑,通常試劑加入后可起到全部或部分消除某些內源性干擾的作用,第二試劑為啟動(dòng)被檢測物質(zhì)反應的試劑,兩種試劑混合后才共同完成被檢項目的生化反應.然后用適當的方法檢測結果.雙試劑型試劑盒,它保持了單試劑的優(yōu)點(diǎn),增強了抗干擾能力和試劑的穩定性,提高了測定的準確性,代表了診斷試劑盒劑型研制的主要發(fā)展方向.

      (二)粉(片)劑型試劑

      所謂粉劑型及片劑型試劑,即是將試劑的各組分用球磨技術(shù)粉碎成粉劑或混合后壓成片劑,使用前再加入指定的溶液復溶成液體試劑.干粉試劑如果在凍干分裝前是液體型的,則其各組分是相當均勻的;但如果用固體原料研磨后制成粉劑或片劑,則存在許多問(wèn)題:

      ①要使試劑各組分混合得非常均勻,技術(shù)難度很大;

      ②分裝過(guò)程中的稱(chēng)量誤差及復溶時(shí)加水量的準確性影響試劑的瓶間差;

      ③水質(zhì)優(yōu)劣對試劑的穩定性和測定的可靠性有相當大的影響.

      二 其它類(lèi)型試劑

      為了適應生化分析儀和測定方法學(xué)的進(jìn)步,近年來(lái)研究了許多新型的試劑盒,主要有以下幾種.

      (一)快速反應試劑盒

      快速反應試劑盒主要是為了適應生化分析的技術(shù)進(jìn)步,縮短反應時(shí)間,提高工作效率.如血液葡萄糖快速測定試劑盒.其試劑成分及濃度為磷酸鹽緩沖液 100mmol/ L,pH7.4±0.1,葡萄糖氧化酶 > 40u / ml,變旋酶 > 0.2u / ml,過(guò)氧化物酶 > 2.5u / ml,4-氨基安替比林 0.5 mmol/ L,4-羥基苯甲酸 4 mmol/L,亞鐵qing化鉀 1mg / L,疊氮鈉 0.4g / L.同一般葡萄糖氧化酶法試劑相比是明顯增加了葡萄糖氧化酶及過(guò)氧化物酶用量,更主要是增加了變旋酶,可使反應加快,3~4分鐘后即生成終顏色.再如快速膽固醇試劑盒,用的是 pH6.6±0.2,250mmol/ L 磷酸鹽緩沖液,膽固醇酯酶為 250u / L,膽固醇氧化酶 250 u/L,過(guò)氧化物酶 4000u / L,4-氨基安替比林 0.3mg /

      L,DHBS 8mmol/ L.樣品與試劑比例是 1:100.37℃反應 2 分鐘即可完成反應.可以明顯看出是加大膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶等效應酶用量,從而使反應加速.目前要求這種快速反應的試劑用戶(hù)還不多,但它是一種發(fā)展趨勢.

      (二)一步法試劑盒

      這是隨著(zhù)方法學(xué)的改進(jìn),特別是

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